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聚丙烯酰胺凝膠(jiāo)電(diàn)泳的用途

聚丙烯酰胺凝膠電泳的用途

 聚丙烯酰胺凝膠電泳的用途: 在制膠前應準備玻璃闆、垂直平闆支架的安裝、密封好得玻璃闆。

聚丙烯酰胺

  1.  首先用洗滌劑将玻璃闆反複清洗幹淨 ,待玻璃闆晾幹後,再将1mm塑料薄片沾少許清水,然後使其貼在玻璃闆上,然後将另一塊凹行玻璃闆與原玻璃闆緊貼在一起。
  2. 再把貼好的玻璃闆,然後放入垂直支架内側,兩側用鋼夾固定好,鋼夾的高度不能超過凹行玻璃的凹口處爲準,兩側選用力度對稱、大小适中的鋼夾。
  3. 将1%的瓊脂糖加熱融化後,倒入支架闆底槽中,然後将其密封起來,再使用容器吸取少量瓊脂溶液,加入到玻璃闆兩邊的縫隙内側,将其密封,冷卻凝固後作爲備用。 用30%的 丙烯酰胺溶液10ml;10xTBE溶液4ml;雙蒸水16ml;20%的過硫酸铵(AP)200ul;TEMED溶液20ul配制PAGE凝膠。 把垂直支架傾斜30°,将配好的名爲PAGE的凝膠溶液沿凹形玻璃平口處緩緩倒入至距平口7mm處爲準,灌膠完成後,用槍吸取少量水密封膠口,壓平膠面即可,後續可以開始點樣電泳。 用微量移液器吸取1ul的溴酚藍溶液,根據PCR産物量大小吸取适量樣品,點入膠孔内即可。點樣結束後,即可接通電源,調節電壓至300V,90min,電泳時間根據PCR産物分子量可适當延長。

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